Ultracentrifugazione (ultracentrifugazione)
Nel ultracentrifuga, l'applicazione del potente separazione centrifuga, trasformazione, analizzando sostanze. Ultracentrifuga originariamente nel 1940 dal chimico Las Goldberg (T.Svedberg) design svedese fisico e produzione, attraverso il miglioramento continuo, è diventata una moderna biochimica e tecniche di biologia molecolare di uso comune.
Classificazione
Ultracentrifuga centrifugazione giri 60000 rpm al minuto o più, la forza centrifuga di gravità è circa 500000 volte, può essere suddivisa in un'ultracentrifuga preparativa e analitica Ultracentrifuge due categorie. Entrambi i sistemi di surgelati e sottovuoto dotati. Preparativa ultracentrifuga maggiore capacità, principalmente per la separazione preparativa mitocondri, lisosomi, e virus, così come gli acidi nucleici biologicamente attivi, enzimi e biomolecole. Ultracentrifuga analitica dotata di un altro sistema ottico in grado di monitorare il processo di spin-off di assestamento comportamento della materia e in grado di scattare una foto. Nel funzionamento Tecnicamente, la centrifugazione differenziale più comunemente usato e centrifugazione a gradiente di densità. Il primo è alternata centrifugazione a bassa e ad alta velocità, la forza centrifuga con diversa resistenza del materiale avente un diverso metodo di frazionamento massa. Questa legge si applica al coefficiente di sedimentazione campioni miscelati variano notevolmente separazione dei componenti. Coefficiente di sedimentazione vicino a separare sostanze sono ampiamente utilizzati centrifugazione a gradiente di densità. Questo metodo utilizza un gradiente di densità può essere formato (nella provetta da centrifuga, la densità aumenta continuamente dall'alto verso il basso) non sarà sostanza bioattiva isolata dalla condensazione o inattivazione di un sistema solvente, dopo centrifugazione delle particelle materiali può premere loro rispettivo densità peso di bilanciamento del solvente per formare la zona corrispondente. Il solvente utilizzato è gradiente di densità di saccarosio o di cloruro di cesio (CsCl) è stato aggiunto. Saccarosio, la prima soluzione è fatta di soluzione di gradiente di densità di saccarosio, e quindi aggiungere il campione alla sua sommità. Dopo centrifugazione, il desiderio di raccogliere i componenti separati possono colpire l'estremità inferiore del tubo un piccolo foro, e la raccolta di frazioni. Come ad esempio con densità CsCl e diffuse rapidamente quando il sistema solvente, campioni può essere miscelato uniformemente con il solvente. Dopo aver raggiunto la centrifugazione, CsCl soluzione gradiente di densità all'equilibrio per formare il campione densità dei componenti è formata alla zona corrispondente.
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