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Cultura Aderente |
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Coltura aderente (cultura allegato) è attaccato alla superficie cellulare di certo allenamento in fase solida. 1 Le caratteristiche di crescita: le cellule aderenti dipendenti nella cultura una volta collegato alla cultura (bottiglia) parete del vaso, una volta che le cellule aderenti si diffuse rapidamente, e poi ha iniziato la mitosi, e ben presto entrato nella fase di crescita logaritmica. Numero medio di giorni dopo la coltura superficie coperta e formano un monostrato denso. 2 vantaggi aderenti: ● facile da sostituire il terreno di coltura; cella stretta adesione alla superficie solida, versare direttamente andare al vecchio fluido cultura, liquido detergente direttamente dopo l'aggiunta di una nuova cultura. ● facile adottare una cultura perfusione, in modo da realizzare lo scopo di migliorare la densità cellulare; grazie alla superficie adesione cellulare, nessun sistema di filtrazione.● Quando cellule aderenti in mezzo di crescita, molte cellule esprimono un prodotto più efficace. ● La stessa apparecchiatura può essere diversa nel rapporto medio / coltura cellulare. ● Adatto per tutti i tipi di cellule. 3 aderenti Svantaggi cultura: confronto con la coltura in sospensione ● cultura in espansione è difficile, grande investimento; ● vasta area; ● Non è possibile controllare in modo efficace la crescita delle cellule; 4 cellule aderenti in superficie: una carica netta positiva e richiede un alto grado di attività di superficie. Richiesto anche per la microveicolo fini con una certa densità di carica, se la superficie della sostanza organica sia idrofilo, e con una carica positiva. 5 Sistema di coltura aderente: una bottiglia rullo, la fibra cava (poi presentazione), perle di vetro, sistema di micro-vettore (descritto più avanti) e così via. ● sistema di coltura bottiglia rullo: formazione inizialmente aderente coltura cellulare dipendente utilizzando il sistema di bottiglia del rullo. Girare fiasche di coltura sono generalmente utilizzati per le piccole e grandi dimensioni coltivazione della fase di transizione, o come un bioreattore cellule seminate preparato un modo. Cellule sono state coltivate in un dispositivo cilindrico rotante - un pallone filatore, pallone di coltura processo transito di rotazione costante, il fluido di coltura cellulare e l'aria sono alternativamente in contatto, fornendo così migliori condizioni per massa e il trasferimento di calore. Cultura bottiglia rullo ha una struttura semplice, meno investimenti, la tecnologia è matura, buona riproducibilità, amplificazione sufficiente aumentare il numero di gioco della bottiglia, ecc. Ma ha anche i suoi svantaggi: alta intensità di manodopera, che coprono un ampio spazio, unità di volume offre una piccola superficie di crescita cellulare, la crescita cellulare, a bassa densità, il monitoraggio colta e controllo delle condizioni ambientali e altre restrizioni. Ora usare il sistema di coltura bottiglia rullo compreso il biossido di carbonio e di incubatore girare categorie di bottiglia. ● i reattori di tali metodi di formazione aderenti, le cellule collegate ad una crescita superficie fissa, senza mescolare, seguito da terreno di coltura come il flusso insieme, è più facile cambiare il terreno di coltura, non richiedono dispositivi di separazione liquido speciale di coltura cellulare, perfusione può essere utilizzato per ottenere coltura alta densità cellulare, possono efficacemente ottenere un prodotto; comunque difficile scala, non può controllare direttamente la crescita delle cellule, tanto più piccola quantità per la preparazione di prodotti biofarmaceutici alto valore. CelliGen, CelliGen Plus ™ e Bioflo3000 reattori sono comunemente utilizzati in coltura aderente bioreattore per la coltura aderente sistema di agitazione cesto cella e disponibili portante a forma di disco. Questo vettore è un tessuto non tessuto fibra di poliestere da 6 mm di wafer di diametro, con una zona ad alto rapporto tra superficie e di volume (1200cm2 / g), facilitare l'accesso alle alte densità di cellule. Basket-tipo sistema di agitazione e il treno vettore è metodi di coltura cellulare più aderenti utilizzati per le cellule ibridomi, cellule HeLa, 293 cellule, cellule CHO e altre colture cellulari. In questo modo le cellule in coltura, le cellule adese subito dopo l'inoculazione. |
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